一、選擇性增菌肉湯的選擇
FDA方法選擇EE肉湯,該肉湯適合所有腸道菌群的生長(zhǎng)繁殖,這就可能對(duì)ES的生長(zhǎng)產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用,降低檢出率。
Nestle和ISO 方法中都選用mLST-Vm,即在大腸菌群增菌肉湯LST中另加入NaCl和Vm 。
研究證明與其他腸桿菌科細(xì)菌(如沙門(mén)菌屬、大腸埃希氏菌等)相比,ES具有較高的耐滲透壓能力。加入0.5 M 的NaCl在保證ES良好生長(zhǎng)的同時(shí),可以有效地抑制上述其他細(xì)菌的生長(zhǎng)。
Vm可有效地抑制G+菌的生長(zhǎng)。而較高的生長(zhǎng)溫度可以進(jìn)一步抑制其他細(xì)菌的生長(zhǎng)。
二、選擇性培養(yǎng)基的選擇
FDA方法使用VRBGA,ISO 方法中使用ESIA,本方法中我們選用DFI。
ESIA和DFI的基本原理相似,二者都是根據(jù)ES能產(chǎn)生α-葡萄糖苷酶,分解底物XaGlc產(chǎn)生有色菌落。
VRBGA對(duì)ES的選擇性差,ES、陰溝腸桿菌和成團(tuán)腸桿菌等多種腸道菌都可以在該平板上生長(zhǎng)并產(chǎn)生粉紫色菌落,膽汁酸沉淀形成紫色暈圈。
即:不能觀察到ES的特征性菌落。
三、顯色培養(yǎng)基的選擇性較好
DFI對(duì)ES的選擇性較好,ES形成的藍(lán)綠色特征性菌落易于辨認(rèn),而且:
硫化氫指示劑可以區(qū)分ES和產(chǎn)生少量α-葡萄糖苷酶但H2S陽(yáng)性菌株(如普通變形桿菌)。
ES都可以在DFI平板上生長(zhǎng)并產(chǎn)生藍(lán)綠色菌落
四、其他常見(jiàn)菌在DFI平板的菌落顏色
1、白色菌落:肺炎克雷伯氏菌、陰溝腸桿菌、大腸埃希氏菌、泛菌屬的多種菌等。
2、黃色菌落:赫氏埃希氏菌
3、黑褐色、粉色或中心藍(lán)綠菌落:少量菌種
ESIA:藍(lán)色,1-3mm