產(chǎn)品名稱 |
人腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞 |
商品貨號 |
MZ-4148 |
組織來源 |
人腎上腺皮質(zhì)組織中分離得到的 |
規(guī)格 |
5×105cells/T25培養(yǎng)瓶 |
生長特性 |
貼壁 |
細(xì)胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測陰性。 |
細(xì)胞描述 |
腎上腺皮質(zhì)構(gòu)成了腎上腺的邊緣部分,它對調(diào)節(jié)機(jī)體內(nèi)平衡起著重要作用,此過程通過分泌皮質(zhì)類固醇和雄激素實現(xiàn)的。分泌的類固醇來源于構(gòu)成腎上腺的三個區(qū)域,這三個區(qū)域構(gòu)建了腎上腺皮質(zhì)的框架。皮質(zhì)中的細(xì)胞來源于中胚層,并形成了三個同軸區(qū)域:球狀帶、束狀帶和網(wǎng)狀帶。研究表明,腎上腺皮質(zhì)區(qū)域與髓質(zhì)區(qū)域之間有著廣泛的聯(lián)系,皮質(zhì)細(xì)胞存在于髓質(zhì)區(qū)域,而嗜鉻細(xì)胞存在于皮質(zhì)區(qū)域。這兩種細(xì)胞的緊密聯(lián)系說明細(xì)胞間存在交換,也使得對兩種腎上腺內(nèi)分泌系統(tǒng)之間旁分泌信號傳導(dǎo)的深入研究提供了可能[1]。腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞可用于激素調(diào)節(jié)和甾類產(chǎn)生的深入研究。 |
細(xì)胞傳代步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
細(xì)胞復(fù)蘇步驟 |
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 |
細(xì)胞凍存步驟 |
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |